91国在线-国产精品婷婷-强被迫伦姧高潮无码bd电影-国产你懂-国产午夜福利在线观看红一片-成人未满十八无毛片-97在线观看免费观看-av在线一-精久久久-av在线精品-一级片aaaa-国产美女精品视频免费播放软件-激情亚洲网-叼嘿视频91-免费无码av片在线观看网址-婷婷激情五月av在线观看-久久综合久久鬼色-亚洲黄色在线观看-国产精品久久久久久tv-国产欧美成人一区二区a片

網站首頁技術中心 > LA795 小鼠肺腺癌細胞傳代/復蘇技巧
產品目錄
LA795 小鼠肺腺癌細胞傳代/復蘇技巧
更新時間:2024-06-11 點擊量:713

LA795 小鼠肺腺癌細胞

,LA-795

貨號:YJ-m108(STR鑒定)

價格: 1350.0

規格: 1*106 

細胞介紹

LA795細胞是于19795月建系的,取自T739近交系小鼠自發乳頭型肺腺癌。LA795細胞原代培養建系,24小時細胞開始生長;首次傳代45天,上皮樣圓形細胞,貼壁生長,T739615Km小鼠皮下移植成功;LA795細胞在T739小鼠肺100%轉移。

細胞特性

1 來源:小鼠自發乳頭型肺腺癌

2 形態:上皮樣   貼壁生長

3 含量:>1x106  細胞數

4 規格:T25瓶或者1mL凍存管包裝

5)用途:僅供科研使用。

運輸和保存

干冰運輸及復蘇好存活細胞

11mL凍存管包裝干冰運輸,收到后-80度冰箱保存過夜后轉入液氮或直接復蘇,若發現干冰已揮發干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染,請立即與我們聯系。

2T25瓶復蘇的存活細胞常溫發貨,收到后按照細胞接收后的處理方法操作。

細胞接收后的處理

1)收到細胞后,75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養箱放置約2-3h,若發現培養瓶破損、有液溢出及細胞有污染,請拍照后及時聯系我們。

2)請在45X顯微鏡下確認細胞狀態,同時給剛收到的細胞拍照(10×20×)各2-3張以及培養瓶外觀照片一張留存,作為售后時收到時細胞狀態的依據。

3)貼壁細胞:細胞在37℃培養箱中放置2-3h,顯微鏡下觀察細胞的生長和貼壁情況,有些貼壁細胞在快遞運送過程中會因振動脫落和脫落后成團的情況。若鏡下觀察細胞的生長密度若在60%以下,可去除培養瓶中灌液培養基(若有未貼壁的細胞需要離心回收,重懸打入到原培養瓶中),加入新配制的完全培養基6-8mL,放到細胞培養箱中繼續培養。若細胞生長密度達70%-80%以上,可以對細胞進行傳代處理。傳代過程中,若因運輸振動脫落的細胞需要離心回收。

4)備注:運輸用的培養基(灌液培養基)不能再用來培養細胞,請換用按照說明書細胞培養條件新配制的完全培養基來培養細胞。  收到細胞后第一次傳代建議T25培養瓶12傳代 。                      

一.培養基及培養凍存條件準備

1 準備RPMI 1640(推薦YJ-0002)培養基;優質胎牛血清,10%;雙抗,1%

2 培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%

3 凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配。

二. 細胞處理

1 凍存細胞的復蘇

將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入到含4-6mL完全培養基的離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心3-5min,棄去上清液,完全培養基重懸細胞。然后將細胞懸液加入含6-8ml完全培養基的培養瓶(或皿)中37℃培養過夜。第二天顯微鏡下觀察細胞生長情況和細胞密度。

2 細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。

對于貼壁細胞傳代可以參考以下方法

1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。

2. 加入0.25%(w / v)胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培養瓶中(T251-2mLT752-3mL),置于37℃培養箱中消化1-2分鐘(難消化的細胞可以適當延長消化時間),然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加入3-4ml10%FBS的培養基來終止消化。 

3. 輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心3-5min,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。將細胞懸液按12的比例分到新T25瓶中,添加6-8ml按照說明書要求配置的新的完全培養基以保持細胞的生長活力,后續傳代根據實際情況按1:2~1:5的比例進行。

3)細胞凍存: 收到細胞后建議在培養前3代時凍存一批細胞種子以備后續實驗使用。

下面T25瓶為例;

1. 細胞凍存時按照細胞傳代的過程收集消化好的細胞到離心管中,可使用血球計數板計數,來決定細胞的凍存密度。一般細胞的推薦凍存密度為1×106~1×107個活細胞/ml.

2. 1000rpm離心3-5min,去掉上清。用配制好的細胞凍存液重懸細胞 ,按每1ml凍存液含1×106~1×107個活細胞/ml分配到一個凍存管中將細胞分配到凍存管中,標注好名稱、代數、日期等信息。

3. 將要凍存的細胞置于程序降溫盒中,-80度冰箱中過夜,之后轉入液氮容器中儲存。同時記錄好凍存管在液氮容器中的位置以便后續查閱和使用。

注意事項

1.收到細胞后,若發現干冰已揮發干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染,請立即與我們聯系。

2.收到細胞先不開瓶蓋,瓶身擦拭酒精后放在培養箱靜置2-4小時(視細胞密度而定)穩定細胞狀態。接著在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數拍照(建議收細胞時就整體外觀拍一張照片,觀察培養基的顏色和是否有漏液情況,隨后在顯微鏡下拍下細胞狀態,100*,200*各一張),觀察記錄細胞在運輸過程中是否有污染情況。作為我方進行銷售依據。

3.由于細胞狀態受環境、操作和運輸等多方面因素影響,故本公司只保證客戶收到細胞后一周內的細胞狀態,故客戶需要售后時需出示收到細胞的時間證明及客戶提供收貨時間和發現問題后客服人員溝通的時間證明,期間間隔時間不能大于7天。

4.所有動物細胞均視為有潛在的生物危害性,必須在二級生物安全臺內操作,并請注意防護,所有廢液及接觸過此細胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。

 

2011年開始我們致力于在生命科學領域生物醫學實驗技術及論文潤色服務,協助客戶各類實驗服務及論文潤色十余年,是您值得信賴的科研合作伙伴!

如果您受時間、試驗條件等限制而無法完成您的課題研究,歡迎您與我們聯系。

實驗技術服務:


滬公網安備 31011802001677號

主站蜘蛛池模板: 免费精品国自产拍在线不卡 | 激情综合网五月婷婷 | 国产真人无遮挡作爱免费视频 | 精品999视频| 欧美午夜三级 | 中出视频在线观看 | 欧美乱妇日本无乱码特黄大片 | 131美女爱做视频免费 | 无码人妻一区二区三区免费n鬼沢 | 狼友网精品视频在线观看 | 成人激情视频 | 国产精品igao | 久久久久久亚洲国产 | 国产成人无码午夜福利在线直播 | 欧色av| 色综合视频一区中文字幕 | 无遮挡又黄又刺激又爽的视频 | 国产动作大片中文字幕 | 美女啪网站 | 欧美精品成人在线 | mm31美女爽爽爽爱做视频vr | 亚洲精品久久久久中文字幕欢迎你 | 熟妇人妻系列aⅴ无码专区友真希 | 久久人人做 | 特级西西444ww大胆高清图片 | 制服丝袜亚洲 | 亚洲欧美日韩综合久久久久久 | 少妇做爰免费视频网站图片 | 在线观看视频毛片 | 一区二区三区乱码在线 | 欧洲 | 久久www成人免费直播 | 国产97碰免费视频 | 丝袜a∨在线一区二区三区不卡 | 无码国产精品一区二区免费式影视 | 激情五月五月婷婷 | 国产精品国产三级国产播12软件 | 日日夜精品 | 国产精品三级赵丽颖 | 国产精品伦理久久久久 | 成人精品在线观看视频 | 一二三区视频 | 四虎5151久久欧美毛片 | 女同性av片在线观看免费网站 | 嫩草午夜少妇在线影视 | 黄色三级视频网站 | 少妇人妻综合久久中文 | 欧美xxxxx精品| 欧美一级性生活 | 毛茸茸性xxxx毛茸茸毛茸茸 | 国产成人精品亚洲线观看 | 免费国产人成18在线观看 | 91成人破解版| 亚洲深深色噜噜狠狠爱网站 | 97在线免费视频 | 欧美三級片黃色三級片黃色 | 4455永久免费视频 | 免费无码av一区二区波多野结衣 | av 一区二区三区 | 99爱免费视频 | 无遮挡又爽又刺激的视频 | 国产伊人网 | 中文午夜人妻无码看片 | 亚洲综合狠狠丁香五月 | 欧美视频影院 | 国产福利第一视频 | 国产成人久久综合777777麻豆 | 精品夜夜澡人妻无码av蜜桃 | 免费无码av片在线观看潮喷 | 亚洲天堂成人在线视频 | 亚洲 欧美 日韩 综合 | 免费观看av网站 | 亚洲精品久久久久午夜福禁果tⅴ | 首页 综合国产 亚洲 丝袜日本 | 精品国产乱码久久久久久1区2区 | 亚洲欧美乱综合图片区小说区 | 婷婷精品久久久久久久久久不卡 | 久久99精品久久久久婷综合 | 日本无遮羞调教屁股视频网站 | 丝袜福利视频 | 日韩精品亚洲人旧成在线 | 欧美成人资源 | 少妇无码av无码专区 | 日本高清免费的不卡视频 | 乱人伦中文视频在线 | 成人国产精品免费观看动漫 | 日本xxxx免费| 白白色2012年最新视频 | 欧美国产成人精品一区二区三区 | 国产无套粉嫩白浆内谢的出处 | 一本大道在线无码一区 | 中文字幕精品亚洲字幕资源网 | 精品国偷自产在线视频九色 | 在线日韩欧美 | 免费人成视频在线播放视频 | 丁香五月网久久综合 | 呦男呦女视频精品八区 | 综合久久2o19| 欧美片一区二区三区 | 男女啪啦啦超猛烈动态图 |